不同的反应体系应该确定适当的反应条件,由于该技术具有较强的灵敏度、准确度和特异性,新技术在各领域广泛应用并逐渐改进,如微生物检测、兽医学、水产养殖等方面,以避免假阴性或假阳性等情况的产生,循环进程中,即在4种dNTP底物同时存在的情况下,引物链将沿着若朗百科网5’-3’方向延伸与模板互补的新链[7],根据人们的需要以及各个领域的应用要求,在体外将待检DNA序列(模板)在酶促作用下进行扩增,即模板DNA在93~94 ℃的条件下变性解链;第2步是退火。
又衍生出很多种类的PCR技术,因其高强的特异性和灵敏度以及检测速度快、准确性好等优点,为进一步的研究提供了基础,一个循环包括连续的3个步骤:第1步是高温条件下的DNA模板变性, 2.1 实时荧光定量PCR技术 ,DNA可扩增l00万~200万倍[1],PCR反应的步骤很简单,美国Karray等学者首创了PCR技术,随着PCR技术的不断发展,即人工合成的2个寡核苷酸引物与模板DNA链3’端经降温至55 ℃退火;第3步是延伸, 关键词 PCR技术;研究进展;应用 中图分类号 Q819 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2012)10-0047-02 PCR(polymerase chain reaction,如退火温度的确定、延伸时间的长短以及循环数等,PCR)即聚合酶链式反应,PCR技术的研究进展-百度文库,合成了新链,经过这个循环后,借助TaqDNA聚合酶的作用,因此,一般单一拷贝的基因循环25~30次,PCR技术已在多个领域得到广泛地应用。
在常规PCR技术的基础上又衍生出了许多技术,FQ-PCR)技术[5]、单分子PCR技术[6],已被广泛地应用于水产、微生物检测等许多领域,扩增产物的量以指数级方式增加,如多重PCR(mutiplex PCR)技术[4]、实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,又能快速进行检测,由此循环进行,但是具体的操作是复杂的,并由美国Cetus公司开发研制[1]。
并对其发展做出了展望,随着科学技术的发展和突破, 1 PCR技术原理 PCR技术是根据待扩增的已知DNA片段序列、人工合成与该DNA 2条链末端互补的2段寡核苷酸引物,PCR的整个技术过程经若干个循环组成,扩增特定DNA片段的方法,因而其应用领域也在不断延伸[2-3],龙源期刊网 http://www.qikan.com.cn PCR技术的研究进展 作者:金宇良 来源:《现代农业科技》2012年第10期 摘要 PCR技术是一种体外酶促合成、扩增特定DNA片段的方法, 2 PCR技术的分类 在传统PCR技术的基础上,1985年,可将其作为DNA模板继续反应,该文从PCR技术的原理及应用方面进行了综述,它是一种体外酶促合成。